將莖切斷丟入清水中
會產生白霧狀
| 《生產及技術》 | 花卉細菌性病害之特性與簡易診斷法 |
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為因應內銷及外銷消費之需求，本省的花卉栽培導向除了要求產量及品質外，更朝著多樣化、新奇性、具象徵性及國際性的目標發展，本省有關之研究及專業栽培的歷史雖短，發展卻相當迅速，但由於臺灣氣候溫暖潮濕，病蟲害的問題將成為花卉生產之一大問題，加上多數的花卉不論是種、苗、球根或瓶苗，大多是業者自國外進口，使得病蟲害的問題更加複雜；本文除描述一般花卉細菌性病害之診斷要領外，對於臺灣已知之花卉細菌性病害之病徵、病原菌特性、病害生態及簡易之病害診斷方法亦描述於後以供參考。
臺灣省農業試驗所 許秀惠
臺灣地處亞熱帶，氣候溫暖潮濕，兼有冷涼氣候型的山坡地，極適合各種花卉類之栽培，且隨著經濟繁榮，國民所得提高，對生活品質也隨之提昇，於是對花卉的需求日殷，使得花卉消費迅速成長，除內銷外，又積極擴展外銷，因此花卉栽培已成為臺灣農業經營之重要一環。臺灣地區花卉從清初已有零星栽培，但栽培面積非常有限，一直到民國六十七年花卉生產面積才達1,241公頃，由臺灣農業年報之記載顯示，這二十年來臺灣花卉栽培成長迅速，民國86年花卉生產面積已達9,968公頃，其中以切花類為最大宗，共4,777公頃，佔總面積之47.9%；次為苗圃類，共4,673公頃，佔46.9%；再其次為盆花類，共461公頃，佔4.6%；其餘球根類及種子類所佔比率較低。
為因應內銷及外銷消費之需求，本省的花卉栽培導向除了要求產量及品質外，更朝著多樣化、新奇性、具象徵性及國際性的目標發展，本省有關之研究及專業栽培的歷史雖短，發展卻相當迅速，但由於臺灣氣候溫暖潮濕，病蟲害的問題將成為花卉生產之一大問題，加上多數的花卉不論是種、苗、球根或瓶苗，大多是業者自國外進口，使得病蟲害的問題更加複雜；據國外文獻記載引起花卉細菌性病害的病原菌包括Agrobacterium，Coryneb-
acterium，Erwinia，Pseudomonas(含近年來重要新分類之Acidovorax，Burkholderia，Ralstonia)及
Xanthomonas等，但較常見的病原菌為Erwinia， Pseudomonas及Xanthomonas 等，尤其是軟腐病菌
(Erwiniacarotovorasubsp.carotovora(Jones)Bergeyetal (簡稱Ecc)；
E.chrysanthemiBurkholder，McFadden&Dimock(簡稱Ech)；青枯病菌(Pseudomonassolanacearum)，P.cichorii及
Xanthomonascampestris內的病原細菌較常見；而臺灣有關花卉細菌性病害之研究資料不多，目前學者曾研究之花卉細菌性病害包括由Acidovorax屬引起之蘭花褐斑病；Agrobacterium屬引起之玫瑰、紫苑及榕樹癌腫病；Burkholderia屬引起之滿天星、星辰花與康乃馨之萎凋病及唐菖蒲頸腐病；Erwinia屬引起之滿天星腫瘤病；Ecc或
Ech引起之海芋、蘭花及菊花苗軟腐病；Ralstoniasolanacearum引起之天堂鳥、銀柳、火鶴花及洋桔梗之萎凋病(青枯病)；以及由Xanthomonas屬引起之火鶴花葉枯病及天南星科葉斑病等；本文除描述一般花卉細菌性病害之診斷要領外，對於臺灣已知之花卉細菌性病害之病癥、病原菌特性、病害生態及簡易之病害診斷方法亦描述於後以供參考。
■花卉細菌性病害之診斷要領
原則上，診斷植物細菌性病害很難單靠病癥來下定論，因為真菌、細菌、病毒或線蟲等不同的病原有時會引起相似的病癥，或同一種病原菌可能引起不同的病癥，因此確實診斷細菌性病害最好能經分離、鑑定及病原性測定等繁雜手續，但是此種診斷法因為需要較多技術或設備，操作不易且時間上又不經濟，對生產者而言只要能確實掌握病因，快速處理問題，避免問題擴大而增加損失才是當務之急，而病癥確是診斷的第一步，因此花卉生產栽培者最重要的是如何根據病癥及簡單的操作來推測可能病因，並迅速掌握防治時機，至於確實診斷病因及病原菌鑑定等工作，必須送請相關的專家協助處理。
雖然細菌引起的病癥，可能與真菌或線蟲或其他因子造成的病徵不易區分，但真菌引起之病害於病組織處用肉眼或簡單的放大鏡或光學顯微鏡可見到真菌的菌絲或孢子等標癥，線蟲引起者可於根瘤處或罹病株內發現線蟲等而加以區分，一般花卉細菌性病害引起的病癥最常見者為軟腐、萎凋、葉枯或葉斑及腫瘤等，現在將如何從病癥或簡單地操作來推測病因的方法描述於後，其餘的診斷特性將在各論中分別探討。
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| 細菌引起之萎凋 將莖切斷丟入清水中 會產生白霧狀 |
(1)細菌引起的萎凋：
若切開維管束除了褐變外，莖部剖面稍加擠壓會有白色菌泥出現，若不易觀察則擠壓後可置於一杯透明的清水中數分鐘，可清楚看見白色雲霧狀菌泥自莖切面溢出，這些都是細菌，但要留意的是取樣時最好能在同一棵病株多取幾處莖切斷面置清水中測試，以免誤診。
(2)細菌引起的軟腐：
軟腐細菌危害作物所造成的病癥均非常相似，顧名思義，最後都是造成罹病組織腐爛，不論危害地上部或地下部，通常被危害的組織常會軟化成為糊狀，後期常因二次感染，罹病組織會出現伴有魚腥味的惡臭，若地下部罹病則地上部因輸導不良會呈現黃化萎凋現象，此時若只觀察地上部病癥則易與萎凋病混淆；另外，為了區分因植株衰弱腐生菌造成植株軟腐與病原細菌造成之植株軟腐，最好先進行簡單的測定，如於葉組織發生軟腐病，可洗淨葉片並切取健全組織與發病組織交界處之病斑，置清水中觀察是否有雲霧狀混濁出現來確認，或用生物檢定法，將罹病組織之汁液滴於洗乾淨之結球白菜組織上，並以乾淨針刺洞造成傷口，再置塑膠袋或盆中保濕約1∼2天觀察結球白菜組織是否有軟腐現象，此法為細菌性軟腐病之診斷指標。
(3)細菌引起的葉斑或葉枯：
一般觀念認為細菌引起之斑點初期會有水浸狀，最後病斑周圍會有黃暈是其特色，但是，事實上其他因素也會引起類似現象，造成初期有水浸狀，後期出現黃暈的徵狀；另外，有些細菌引起的葉斑，其病癥會出現輪紋，易與真菌引起的病癥相混淆，所以單由病癥要來分辨是否為細菌引起之葉斑相當不易，必須用放大鏡觀察是否有真菌之病原體存在，或以顯微鏡檢查或利用選擇性培養基或病原性測定，或甚至用血清學的技術來分辨，較不易出錯。
(4)細菌引起的腫瘤：
造成腫瘤的原因很多，如昆蟲、線蟲、真菌、細菌及非生物的因子，所以觀察罹病植物組織若無蟲咬痕、蟲體或放大鏡觀察無線蟲也無真菌的構造時，雖可懷疑是細菌所引起，但仍需經柯霍氏法則證實才可確認。
■各論
一、Acidovorax屬引起的蘭花褐斑病(brownspotofOrchidaceae)
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| 細菌引起之軟腐 在組織上會造成水浸狀腐爛 且伴有魚腥味惡臭 |
●病癥
本病為蘭花上重要的細菌性病害，主要危害蝴蝶蘭，由剛出瓶至開花成株都容易受害，特別對剛出瓶的聚合盆，常常整盆幼苗受害死亡。褐斑病病原菌感染蝴蝶蘭幼苗時最初出現水浸狀小斑點，在環境適宜時，此斑點會逐漸向外擴大，形成橢圓形、長條形或不規則形之深綠色或黑褐色的大形水浸斑，病斑周圍常會出現墨綠色環紋，病斑迅速擴大成大型斑點或條斑，且很快達到生長點，而使幼苗黃化乾枯死亡。感染成株時，病斑可以在葉片任何部位出現，有些病斑轉成褐色斑後就停止擴大，但環境適合病斑會繼續擴大，當達到生長點時，即引起全株死亡。以針刺法接種該菌於嘉德利亞蘭、文心蘭、狐狸尾蘭、朵麗蝶蘭、千代蘭、春石斛及秋石斛，也均可造成類似上述的病斑。
●病原菌
本病由Acidovoraxavenaesubsp.cattleyae(原名為
Pseudomonascattleyae)引起，該菌為革蘭氏陰性、桿狀、具有1∼2根單極生鞭毛，在培養基上為白色菌落之好氣性細菌，於
12∼40℃下均能生長，在20∼32℃間生長良好，最適生長溫度為28℃。
●病害生態
褐斑病的發生條件與軟腐病相似，喜愛溫暖多濕的環境，因病原菌生存溫度範圍很廣，在臺灣蘭園內周年皆會發生，而以春秋季最嚴重，其它季節偶而亦可見到其蹤影。本病原菌極易經由傷口感染，危害情況雖不如軟腐病快速，但此病原菌殘存能力強，溫室內一旦出現該病後，雖然努力地剪除病葉，但此病菌仍存在該株其它部位，同時漸次向外擴展，根除不易。從褐斑病病斑溢出之菌泥為主要傳播來源，菌泥藉著葉面澆水、噴霧給水、施肥或噴藥而散布至健康蘭花上，造成第二次感染。由於本病原菌只為害蘭科植物，因此第一次感染源可能是新帶入的植株帶有病原菌所致。
●診斷要領
蝴蝶蘭褐斑病與軟腐病病癥不同之處，主要為前者罹病葉片之組織仍甚堅硬，病葉亦可保持其原姿，而罹軟腐病之病葉通常濕軟且不易維持原姿。但是若幼苗感染褐斑病，則會很快軟腐而壞死，病癥與軟腐病相似，不易分辨，必須借助結球白菜組織軟腐測驗法加以區分。而與蘭花疫病則可由鏡檢或分離及選擇性培養基等方法分辨。
二、
Agrobacterium屬引起之玫瑰、紫苑及榕樹癌腫病
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| 細菌引起之玫瑰腫瘤 |
由Agrobacteriumtumefaciens引起的癌腫病是一種相當古老的病害，自發現此病害距今已近百年，除少數菌株寄主範圍狹窄外，大部分菌株之寄主範圍相當廣泛，至少可感染138科588屬1,193種以上的植物，主要以感染被子植物中的雙子葉植物為主，但也感染少數的被子植物中之單子葉植物及裸子植物，其中較具經濟重要性的寄主有桃、梨、蘋果、杏、葡萄等果樹類，菊花、玫瑰等觀賞作物，以及松、樺木、白楊等森林植物。臺灣有關癌腫病最早之記載於1959年調查甜菜病害時首度紀錄，1967年調查溫帶果樹病害時於蘋果上發現癌腫病，1980年調查臺灣木本植物病害時，也紀錄了檸檬桉癌腫病，直到1992年王氏曾分離造成臺灣赤桉及玫塊桉植株上腫瘤的病原菌，發現係由癌腫病菌(Agrobacterium
tumefaciens)所引起，1997年證實臺灣已有多種作物感染癌腫病。
●病徵
目前已發現榕樹、玫瑰及紫苑癌腫病，腫瘤常發生於根冠、樹幹或枝條之修剪處或其他傷口處，有些腫瘤上會產生許多黃綠色小芽，腫瘤大小為數厘米至數十公分。
●病原菌
該細菌為革蘭氏陰性，好氣性，在PDA培養基上為黏濕，圓形，突起，具亮光，不透明的白色菌落，為具有1∼6根週生鞭毛的桿狀細菌，最適生長溫度為
25℃至28℃，38℃以上則細菌停止生長。
●病害生態
癌腫病為一土壤傳播性病害，病原菌可在土壤中尤其是根圈附近存活數年，當寄主植物有傷口時，病原菌可侵入感染造成病害，此病害常於苗圃發生，藉由苗木運輸再將病害傳往他處。
●診斷要領
因為造成腫瘤之因素頗多，為避免誤診，樣品需經組織分離，而且在土壤中或罹病組織上容易分離到無病原性之菌株，因此分離所得之細菌需進行病原性測定，可將培養之細菌直接塗抹於胡蘿蔔切塊上，或針刺接種於番茄之葉柄或莖上，或針刺接種於落地生根等植株上，視其是否產生腫瘤而判斷之。另外，亦可應用對致癌質體具有專一性之核酸探針，可區別病原菌或為腐生性之Agrobacterium菌株。
(摘錄部份內容)